Valutazione in vitro

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LEZIONE 5 – 07/10/19 VALUTAZIONE BIOLOGICA in vitro e in vivo Processo di valutazione di una struttura bioartificiale: Perché fare più studi? Il comportamento del materiale varia a seconda delle cellule con cui si trova in contatto, sappiamo che è un biomateriale, ma potrebbe cambiare le sue caratteristiche con la lavorazione Esempio: - se cambia il peso molecolare, cambia anche la cinetica di degradazione e potrebbe esserci rilascio di prodotti tossici/in quantità elevate e non previste - se uso un solvente, esso potrebbe essere rilasciato nel corpo e risultare tossico Modifiche di superficie --> rivestimenti per migliorare interazione con le cellule (da verificare) Valutazione in vivo si esegue solo all’ultimo step, mentre in vitro anche negli step intermedi IN VITRO - TEST CELLULARI In laboratorio verifico come si comporta il materiale a ogni step usando delle cellule che provengono da tessuti animali o umani, necessario è lavorare in condizioni di sterilità, sotto cappa biologica a flusso laminare, posso già così vedere l’effetto delle tecniche di lavorazione sul materiale Le cellule devo essere mantenute in coltura (coltura cellulare) in condizioni standard, seguendo protocolli ben definiti, per espanderle e raggiungere il numero desiderato --> compro una quantità di cellule che potrebbe non essere sufficiente per tutti i test, quindi le devo espandere nel flask/piastre di coltura Raggiunto il numero di cellule necessarie posso usarle per test di interazione con materiali/strutture prodotte Quali cellule? 2 classi: - Immortalizzate: cellule modificate geneticamente o che derivano da colture primarie di tumori Vantaggi:  Standardizzazione e riproducibilità --> la provenienza è sempre la stessa e quindi si comporteranno allo stesso modo  Reperibilità --> essendo…